frottis sanguin

[DUTILLEUL213]

Bonjour tout l'monde,

En faisant une préparation, je viens de me piquer le pouce avec une sonde, j'en ai profité pour étaler le sang sur une lame .
J'ai un problème car ce n'est pas la première fois que j'essaie, je ne sais pas comment doser le colorant liquide de Giemsa , si quelqu'un peut m'aider ce serait très gentil, ce n'est pas urgent ?
Merci beaucoup

[PierreH]

Bonjour,

le Giemsa doit être dilué au 1/10ème dans le l'eau au pH très proche de 7 (neutre) : à pH 6.8, le coloris est plus rose, à pH 7.2, le frottis est plus violet.
Certains utilisent directement l'eau minérale Volvic avec succès (Clinique Pasteur Toulouse).
On peut aussi faire varier très légèrement le taux de dilution du Giemsa pour varier la précipitation du colorant.
http://bioimage.free.fr/hem_image/col_mgg.pdf
http://fr.wikipedia.org/wiki/May-Gr%C3%BCnwald_Giemsa

[DUTILLEUL213]

Bonjour,

Génial, merci beaucoup Pierre pour ces précisions et les liens, j'ai de quoi faire et m'amuser. Si je réussis, je ferais le sang des petits animaux que je trouve. J'espère pouvoir envoyer une photo potable !

[baguette]

Et le May-Grünwald, on ne l'utilise pas avant ? Non seulement en tant que colorant mais aussi en tant que fixateur (dilué dans l'alcool méthylique).

May-Grünwald pur, deux à trois minutes

rinçage, eau tamponnée, mais l'eau du robinet suffit

Giemsa dilué au 1/10ème, 20 à 25 minutes

rinçage, eau tamponnée pour le rinçage (ou eau du robinet).

[DUTILLEUL213]

Bonjour,

Hier j'étais absente donc j'ai commencé ce matin sur la lame complètement sèche, j'ai mis une goutte d'alcool et j'ai laissé séché et en fait je vais faire l'essai avec uniquement le Giemsa car je n'ai pas de May-Grünwald pur, il faut que je m'en procure.

[DUTILLEUL213]

Bonjour,

Je recherche un flacon de May Grunwald, j'ai trouvé en petite quantité 7,5 ml, peut trop peu car il faut immerger la lame et sur e bay , http://www.ebay.fr/itm/Microscopy-stain ... 25774ba5b3
Est ce que ce dernier conviendrait ? merci si vous pouvez me répondre ? bonne journée à tous

[PierreH]

bonjour,

ne t'embête pas à immerger la lame dans un flacon :
comme en microbiologie, je te conseille de mettre ta lame parfaitement à l'horizontale au dessus d'un bac (les pros utilisent 2 baguettes en verre dont les extrémités sont reliées par un bout de tuyau souple pour poser la lame, dans ton cas, 2 crayons posés parallèles en travers d'un vieux tupperware suffiront), et tu recouvres ton frottis du colorant. Par capillarité, ton colorant va rester sur la lame.

[DUTILLEUL213]

Bonsoir pierre,

Good, il ne me reste plus qu'à acheter un peu de May Grünwald chez Monsieur LECOMTE, car ce n'est pas facile à trouver et comme cela je ferai comme il est indiqué sur le premier lien.
Merci

[superjeje]

Bonjour Catherine

Tu peu en trouver ici : http://begenat.com/ . J'ai déjà commander plusieurs fois , ils sont très bon et tu paye à la livraison ( Tu envoie un chèque ) .

[DUTILLEUL213]

Hello Jérôme,

Très contente d'avoir trouvé ce site attrayant grâce à toi pour pouvoir commander quelques produits. Merci beaucoup.