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Premier essai de double coloration.
Posté : 11 sept. 2009 19:19
par BelialL
Bonjour, bonjour,
Aujourd'hui, premier essai de double colo, avec le vert d'iode et le carmin aluné dans un pétiole de Rumex crispus, première plante sur laquelle je suis tombé.
La coupe est faite à la main, couteau et lame porte-objet pour servir de guide. Après de nombreux essais, je suis enfin parvenu à quelque chose d'acceptable que j'ai malheureusement abimer au cours des manipulations : en bas à gauche...
Ensuite ;
-Javel 10min.
-Lavage ~1min.
-Acide acétique 5min.
-Vert d'iode 15 sec.
-Alcool 95% élimination du surplus
-Eau
-Carmin aluné un peu moins de 10min.
-Lavage
J'ai réussi à obtenir ceci :
Je trouve le vert d'iode un peu léger, peut-être aurais-je dû l'y laisser plus longtemps ou y aller plus doucement avec l'alcool...
- petiole_de_rumex_crispus_l_01.jpg (185.44 Kio) Vu 3823 fois
- petiole_de_rumex_crispus_l_02.jpg (184.73 Kio) Vu 3823 fois
Re: Premier essai de double coloration.
Posté : 11 sept. 2009 23:14
par Klaus
Bonsoir Kévin,
bravo pour une coupe à la main - et une première c´est très encourageant!
Le carmine aluminé est une colo toujours un peu léger. Fuchsine/chrysoidine sont plus intensif. Et pour le vert la combination de alcian jaune et alcian bleu donnent un vert fort! Et c´est seulement
une mixture de 4 componentes! L´usage est très facil!
La variante "bleu" est bien connue sur le nom "Etzold"
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Re: Premier essai de double coloration.
Posté : 12 sept. 2009 08:38
par André
Bonjour à tous, Kevin,Klaus
Pour une première, comme Klaus, je dis bravo !
les problèmes de colorations sont à mon avis des détails, que klaus , qui est un maître de ces techniques , pourra facilement
te résoudre !
Ce qui est le plus important est la minceur de la coupe, ce que tu as parfaitement maitrisé !
Je note aussi que l'utilisation d'une loupe binoculaire est pratiquement suffisante pour des coupes végétales.
Tu as un socle pour diascopie?
Re: Premier essai de double coloration.
Posté : 12 sept. 2009 08:56
par BelialL
Salut,
Merci à vous.
Voilà de sacrées colorations Klaus !
Oui ma bino fonctionne en diascopie aussi, c'est d'ailleurs ce que j'utilise le plus souvent.
Re: Premier essai de double coloration.
Posté : 13 sept. 2009 22:54
par BelialL
Un deuxième !
Toujours la même méthode.
Je ne suis pas tout à fait régulier dans la coupe...
geranium_molle_l_01.jpg
geranium_molle_l_02.jpg
Re: Premier essai de double coloration.
Posté : 13 sept. 2009 23:24
par Klaus
Je ne suis pas tout à fait régulier dans la coupe...
calme, calme Kévin - je connais d´autres microscopistes qui essaient de faire des coupes comme celles de toi
depuis deux ans!
Sans aide d´un microtome typ Ranvier c´est prèsque impossile d´améliorer. C´est vraiment bon!
La colo est aussi plus jolie (le vert est intensif!) le rouge ne sera jamais plus fort avec le carmine.
La techique de photos: tes collègues en Françe peuvent t´aider mieux que je peux: il me faudra min. une heure pour expliquer en français
Re: Premier essai de double coloration.
Posté : 14 sept. 2009 12:52
par BelialL
Merci Klaus !
Pour la coupe, ça va bien pour ce qui est des prélèvements assez mous et de diamètre raisonnable.
En fait je place la tige sur un support, je met ensuite une lame que j'appuie un peu dessus afin de bloquer le tout.
Après la lame sert de guide :
Une première coupe avec le couteau bien droit, c'est le biseau qui va faire mon épaisseur.
Ensuite je penche le couteau pour que le biseau soit parallèle au champ de la lame et le coupe est faite.
Moins l'angle d'affûtage est important plus la coupe est fine.