Le Naturaliste

Bonjour,

dans mes tout premiers essais de coloration (malheureusement sans photo) avec le colorant combiné "carmino-vert de Mirande" sur des coupes d'aiguilles de romarin, je me retrouve avec des coupes presque uniformément vertes dès la sortie du colorant et jusqu'au dernier rinçage à l'eau ou à l'alcool ... J'ai ensuite eu un autre souci majeur : j'ai laissé sécher mes coupes quelques secondes, je dois donc tout recommencer, car elles ne sont plus regardables
J'avais choisi ce colorant car il me semblait plus simple d'emploi pour débuter. C'est peut-être un mauvais choix.
Mais de vos propos, je retiens une chose : vous parlez d'une coloration combinée et (à moins que j'aie sauté des épisodes) vous décrivez tous la coloration en deux temps : d'abord vert puis carmin.
Je vous tiendrai au courant des heurs et malheurs qui m'attendent.

edit : j'ai envoyé le message en double. Désolé...

Cher Jean,

j´aimerais bien de te faire un cadeau - parce que tu est "un bon client". Je te donne pour un test Etzold bleu et Etzold vert. Je viens de finir la preparation de tous mes colos. Et une nouveauté: un set "Wacker W 3A " plus facil Acridinrot, Acriflavin ensemble et Astrablau. (en deux flacons)

http://www.lenaturaliste.net/forum/view ... 156&t=4649

Un resultat de la colo W 3A
bien amicalement

Klaus

Bonjour Klaus,

c'est proposé si gentiment que je ne peux pas refuser Merci !

Bonjour Jean,

je n´ai pas oublié que j´ai promis de te faire cadeau.. J´était occupé d´une péparation d´un cours "microscopie" à l´école.

le thème: Coupes colorés


Je viens de la poste, c´est en route!

Bonjour Klaus,

je vois que tu es bien entouré avec les jeunes, bravo !
J'aimerais bien trouver un groupe près de chez moi (même des moins jeunes) pour apprendre au lieu de bricoler tout seul.

Maintenant, je vais guetter le facteur tous les jours. En attendant, j'essaie d'améliorer mon procédé de coupe.

Re Jean,

je vais guetter le facteur tous les jours

si il est femelle tu la donne 3 bises! et pour moi un "réçu" stp!

Malheureusement, il a une moustache

Bonjour,

Klaus, je viens de trouver le paquet dans ma boîte aux lettres.
Je n'ai pas vu le facteur, donc pas de bise à donner (ouf !!!)
Grand merci encore !

Bonsoir, je cherche de l'aide: en confectionnant des coupes végétales je rencontre systématiquement un problème: mes coupes se décolorent lorsque je les repasse dans la série des alcools avant le toluène. Ce constat est valable pour le carmin aluné, la safranine; le vert d'iode résiste. Que faire, où est l'erreur? Ose-t-on laisser la coupe colorée sécher et l'inclure directement (j'utilise l'eukitt)?
Merci pour vos propositions.
Pierre

La safranine se dissout trés facilement dans les alcools, speciallement dans l'alcool éthylique dillue (50%, 70%). La déshydratation doit se faire si vite que possible et dans les alcools éthylique de haute concentration ou dans l'alcool isopropylique de haute concentration.

En general: les colorants basique se dissout mieux dans l'alcool méthylique que dans l'alcool étylique que dans l'alcool isopropylique.

Un solution c'est de laisser sècher les coupes quelques secondes sur un tissue suivi d'un déshydratation dans l'alcool isopropylique pur. C'est la methode que j'utilise, voir ci dessous (coloration safranine-blue astra). Un autre solution c'est d'obtenir un coloration plus intense avec la safranine en utilisant un mordant.
Malheureusement ces mordants (acide phénique, acide chromique, aniline) sont dificille a obtenir, mais il-y-a un qu'on peut obtenir: le bichlorure de zinc en solution aqueux a 2%.

La plupart des colorations avec le carmin doivent etre fixer avec un acide: le carmin se dissout facillement dans les solutions basiques.

Ces doubles colorations simultane aparaissent tous simple, mais en realite c'est souvent tres dificille d'obtenir des bonnes resultats. C'est la même chose avec quelques de ces colorations en histologie animale: le Van Gieson (acide picrique-fuchsine acide) et le bleu d'aniline-orange G de Mallory. La solution est simple: coloration successive...