de Wouazo » 01 Juil 2010 18:24
Bonjour à toutes z’é à tous,
Vous savez que je veux changer mon microscope because que j’ai des problèmes pour faire des comptages chromosomiques. Je vais vous donner la méthode que j’utilise pour les ptéridophytes.
Pour la préparation des lamelles, il faut faire sortir les sporanges des sores et contrôler s'il n'y a pas d'éléments intrus, j'utilise une loupe stéréo de chez Nachet qui me permet d'agrandir 45 fois
On prélève quelques pinnules et à l'aide d'une aiguille l'on dispose environ 6 sores sur une lamelle de verre. Sous loupe bino, on enlève les indusies, de sorte qu'il ne reste plus que les sporanges. À cette occasion, la lamelle repose sur un fond noir. Pour effectuer cette opération, l'on utilise une loupe binoculaire. On mouille à l'aide d'une pipette la préparation avec un fixateur et l'on pique l’ensemble avec une l'aiguille, pour que les sporanges nagent dans la solution. On enlève les impuretés et l'on vérifie qu'il ne subsiste pas de fragment d'indusie.
On amasse le tout, en un petit tas à l'aide d'un minuscule scalpel, de sorte que le bain de fixage s'évapore en grande partie. On sèche la lamelle sans sécher le tas. Peu avant qu'il ne commence à se dessécher, on y pose une petite goutte d'acide acétique carminé. À l'aide d'un mini-scalpel, l'on écrase, avec précaution, la préparation afin d'obtenir l'éclatement des sporanges et la libération des cellules des spores qui doivent nager dans la solution colorée.
L'on met une lamelle couvre objet. On chauffe le montage à environ 50°C. L'on écrase, le tout à l'aide de ses pouces. Perso je fais cela sous bino avec une aiguille lancéolée.
Observation à 200 pour les débutants. À ce grossissement les cellules sont très petites, mais on a une bonne vue d'ensemble et surtout l'on se rend compte s'il s'agit d'un bon ou d'un mauvais choix.
Lorsque je tombe sur une cellule intéressante, (une cellule avec des chromosomes bien étalés), je passe au grossissement X 400 et si c'est bon x 800 et je fais des photographies.
Une préparation microscopique facile à réaliser
Les racines qui se développent sur les bulbes d'oignon, d'ail ou de jacinthe constituent un bon matériel pour l'observation des mitoses. Des extrémités de racines sont immergées pendant une minute dans du carmin. Elles sont montées entre lame et lamelle. On chauffe et on appuie très sur la lamelle afin de dissocier les cellules, en évitant tout déplacement latéral.
Pour compter, j’utilise Mesurin sur les clichés.
A votre disposition pour les infos complémentaires
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