Bonjour,
Belles manips, mais je me demande quand même si on ne peut pas avoir mieux comme résultats:
Normalement une analyse en fluorescence se fait avec 2 filtres (et plus souvent avec des filtres dichroïques).
Il faudrait:
- éclairer, comme tu le fais, avec des UV purs (donc LED UV + filtrage passant UV car l'émission des LEDs comporte encore de la lumière visible)
- Regarder/photo à travers un filtre éliminant les UVs et laissant passer le visible
(Le dichroïque fait cela naturellement)
Car sur les photos que je vois, tu photographies l'éclairage UV, et tu ne discernes pas bien la fluorescence verte ou rouge (car la scène est aveuglée par les UV non utilisés).
Le phénomène de la fluorescence s'explique en envoyant une lumière énergétique (UV) dont les photons vont exciter les électrons (en sautant au moins 2 bandes d'énergie) et ces électrons pour revenir à leur état naturel (dû à la température normale) et vont migrer sur des bandes d'énergie intermédiaires. Les photons émis auront donc moins d'énergie que ceux éclairants UV. Leur longueur d'onde sera plus longue (genre vert, jaune, rouge , IR ...)
Le phénomène de la fluorescence demande donc un éclairage UV (ici) et sera visible hors UV...
Il faut d'autres parts connaitre les longueurs d'onde associées à l'excitation, et à la fluorescence. (tout dépend des niveaux atomiques)
Sur un type de cristal il peut être nécessaire d'éclairer avec du 353nm pour obtenir une fluorescence, et pour un autre cristal avoir du 384 nm. Heureusement les LEDs ont un spectre d'émission assez large.
En regardant ma page http://pichotjm.free.fr/Docu/Microscopie/Eclairage/_Modif_BHS.php qui explique l'introduction de LEDs dans un microscope, je montre aussi le montage de LEDs UV et propose des photos de fluorescence avec mes BH2. J'y explique que des UV peuvent fournir des fluorescences vertes, ou rouges, et qu'un éclairage vert peut donner une fluorescence rouge...
Trés cordialement, en espérant t'apporter de l'aide. C'est un sujet qui peut se compliquer à souhait: spectre, filtres étroits, IR, ...
JMP