Bonsoir à tous,
2 précisions :
-0.17mm ne correspond pas à une épaisseur de lamelle, mais à l'épaisseur de milieu au devant du spécimen observé.
A moins d'utiliser un milieu de montage compressé et réticulable rapidement sous une source UV tel que pratiqué sous certains automates de montage en histologie, il reste du médium entre la lame et le spécimen. C'est l'explication de l'épaisseur de 0.15 à 0.16mm des lamelles calibrées. On arrive aux 0.17mm d'épaisseur de préparation très rapidement (voir bien plus si l'on veille pas au grain). Avec une optique courante, on visualise mal les différences de résolution, avec une optique pointue, l'effet est immédiat.
- attention aux pas de Z-Stack. Un déplacement mécanique de 1 micron sur l'axe Z d'un spécimen immergé dans un milieu d'indice 1.45 (les acryliques classiques par exemple) sera observé comme une hauteur de 1.45 microns. Il me semble en avoir déjà parlé, il y a longtemps.