Importance des lamelles couvre-objets

[Bernard-J]

Bonjour,
J'ouvre ce nouveau fil parce qu'il me semble suffisamment important.
Tout-d'abord merci à André pour le lien http://www.afl-lichenologie.fr/micro/descript00.htm
concernant le sujet http://www.lenaturaliste.net/forum/viewtopic.php?f=193&t=17542&p=98465#p98448
Ce site est bourré d'informations utiles pour tous microscopistes.

Je signale une petite erreur dans la partie 5. Objectifs -L'épaisseur de la lamelle couvre objet:
"En principe les lamelles ont 17 µm d'épaisseur, soit 17 mm pour les 100 lamelles de la boîte."
Les lamelles ont évidemment 170 µm d'épaisseur et non 17 µm.

Ceci dit, il me semble que l'importance de la qualité des lamelles (et des préparations) est un sujet négligé sur ce forum, où l'on y trouve a contrario de très nombreuses contributions sur les qualités "indispensables" des objectifs Planapo et Cie.

Extraits du site suivant dans le chapitre "Effet du couvre objet":
http://www.labomediqual.ch/microscope/geomop.htm
"L'effet d'un couvre-objet de mauvaise épaisseur est plus grand si l'objectif possède une ouverture numérique plus grande et devient gênante en dessus d'une ouverture numérique d'environ 0.4. Avec un objectif "sec" d'ouverture numérique de 0.95 (objectif typique apochromatique 40x) une différence de 0.02 mm dans l'épaisseur du couvre-objet dégrade sérieusement la qualité de l'image !... ... Les couvre-objets de bonne qualité spécifient l'épaisseur sur le couvercle de la boîte et elle ne varie que dans une limite très étroite. Vous pouvez ruiner la situation en préparant votre lame de façon inadéquate !"

J'avais acheté en son temps des lamelles courantes et aussi des lamelles de qualité (évidemment plus onéreuses) en pensant les réserver pour la photographie. Évidemment, c'était idiot, car quand LE protozoaire photogénique se montrait, la lamelle choisie n'était pas la meilleure.

En immersion à l'huile, l'épaisseur de la lamelle n'est pas importante à cause des indices de réfraction similaires, reste probablement les diverses qualités du verre des lames et lamelles. Mystère??

Pour l'observation et les photos au microscope, nous utilisons très souvent l'objectif 40x .
Je vous pose la question:
Est-il préférable d'utiliser un objectif super-top et cher avec une crouille lamelle ou un objectif courant-moyen avec une lamelle de qualité ?
Je me réjouis de lire vos avis, car je n'ai pas de réponse à cette question.

[Fredlab]

Hello

Je réagis vite fait à ce début de topic, très intéressant.
Je ne suis pas un bon préparateur de lame et je viens de trouver une explication au fait que je ne suis pas très satisfait du rendu mon Olympus SPlan Apo 40/0,95. Il a certes un correcteur d'épaisseur de lamelle, mais j'ai bien du mal à me servir de la chose.
En fait, je vais finir par reprendre un SPlan 40/0,7 (adapaté qui plus est au prisme DIC de mon condo) car pour des observations courantes, il m'a semblé que c'était plus agréable.
Bref... sans contrôle, la puissance n'est rien.
(je vais quand même garder l'Apo pour des jours meilleurs)
(acheter un matériel pointu rend modeste... on ne peut pas se cacher derrière)

En immersion, il me semble que chez moi, l'association DPlan 40/1,3 + condo aplanétique (celui qui fait aussi du DIC) fonctionne bien.
Disons que je suis assez heureux du rendu de ces Diatomées.

[6le20]

Bonjour à tous

Merci Bernard du lancement de cet intéressant sujet.
Lors de mon rapide et lointain passage dans les labos du muséum, j'ai pu observer qu'en fonction du sujet de recherche, le choix de lamelles était très différent. A l'époque je n'ai pas cherché plus loin. Ton sujet me fait "tilt" quelques 40 ans plus tard....

Merci FedLab pour ce lien et cette touchante résurrection...

[André]

Bonjour à tous, Bernard

J'avoue utiliser des lamelles sans connaître exactement leurs épaisseurs.
J'en utilise de 2 sortes:
Des Marienfeld 22x26 n°1.5 et des Menzel 18x18 St.1 que je suppose vouloir dire Stärke 1.
Je les utilise principalement pour des observations à l'eau comme medium , parfois complété avec du "Aqueus Mountant de Brunel", utilisant des objectifs 2.5, 6.5, 10, 25, 40 .
Je n'ai pas remarqué de problèmes particuliers quant à la définition des images..

lamelles.jpg (119.24 Kio) Vu 8108 fois

[PierreH]

Bonsoir,

il est important d'utiliser des lamelles de l'épaisseur adéquate car la lamelle fait partie intégrante de la formule optique de l'objectif.
Plus on s'éloigne de la valeur idéale, plus l'aberration (de sphéricité il me semble) est importante sur l'image. Cette aberration est plus sensible sur les objectifs d'ON élevés.
Sur les objectifs équipés d'une bague spécifique (notée CORR, KORR...), on peut corriger cela dans certaines limites (cela se voit assez nettement visuellement) mais l'usage que j'en connais sert plutôt à compenser l'épaisseur du médium qu'il y a entre le sujet et la lamelle en anatomopathologie...

[Bernard-J]

@ André
Sauf erreur tes lamelles Menzel&Gläzer ont une épaisseur de 0.13 -0.16 mm
https://de.vwr.com/store/catalog/product.jsp?catalog_number=631-1334
et les Marienfeld devraient être d'une meilleure qualité avec une épaisseur de 170 μm ± 5 μm
http://www.marienfeld-superior.com/index.php/cover-glasses/articles/precision-cover-glasses-thickness-no-15h-for-high-performance-microscopes.html

Il est aussi intéressant de constater qu'il existe des lamelles hydrophobes pour la cristallographie et d'autres optimalisées pour la fluorescence.

En ce qui concerne l'hydro-philie-phobie j'aimerais bien traiter mes lames porte-objets afin qu'elles deviennent plus hydrophiles,.. si quelqu'un connait une recette, je suis preneur...

[BINO-BONI]

En ce qui concerne l'hydro-philie-phobie j'aimerais bien traiter mes lames porte-objets afin qu'elles deviennent plus hydrophiles,.. si quelqu'un connait une recette, je suis preneur...

Tu veux parler de l'augmentation de la tension superficielle pour éviter que l'eau ne s'étale trop?

il y a ça: http://www.boussey-control.com/tension- ... ielleb.htm
C'est peut-être un peu trop superficiel !!!

Plus simplement, la colle au silicone suivi d'un essuyage. Je vais essayer.

[Bernard-J]

Tu veux parler de l'augmentation de la tension superficielle pour éviter que l'eau ne s'étale trop?

L'inverse ! J'aimerais que l'eau s'étale mieux.

[Daniel]

J'aimerais que l'eau s'étale mieux.

Pourquoi ne pas les dégraisser avec un peu de détergent (liquide vaisselle) ?

Le problème est qu'il faut rincer et sécher sans casser ensuite...

[Fredlab]

Alcool ?