Première coupe botanique et coloration

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Première coupe botanique et coloration

Messagede Yin_Zhen » 05 Jan 2021 11:44

Bonjour
J'ai réalisé ma première préparation de coupe botanique.
Il s'agit d'une coupe de tige de mauve réalisée au microtome de Ranvier "sécurisé" avec de la moëlle de sureau naturelle.
- fixation (1/3 vinaigre cristal, 2/3 alcool 90°)
- extraction contenu cellulaire (hypochlorite)
- coloration safranine et fast green
- montage à la glycérine alginatée.
- rinçages eau déminéralisée entre les étapes
Merci d'avance pour vos commentaires concernant la coupe et la coloration.
Concernant cette dernière, je ne suis pas du tout sûr de l'avoir faite correctement : il me semble que le fast green ne change rien du tout ! Par ailleurs, la coloration a largement diffusé dans le milieu de montage.
Ci-jointes trois photos.
tige_de_mauve_4.jpg
Exif et Meta MicroCartouche tige_de_mauve_4.jpg (155.28 Kio) Vu 3429 fois

tige_de_mauve_10.jpg
Exif et Meta MicroCartouche tige_de_mauve_10.jpg (163.33 Kio) Vu 3424 fois

tige_de_mauve_40.jpg
Exif et Meta MicroCartouche tige_de_mauve_40.jpg (179.65 Kio) Vu 3424 fois
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Re: Première coupe botanique et coloration

Messagede 6le20 » 05 Jan 2021 14:23

Bonjour !

Je trouve ce premier essais très encourageant ! :D
Amicalement

Sylvain
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Re: Première coupe botanique et coloration

Messagede Yin_Zhen » 05 Jan 2021 16:30

Merci !
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Re: Première coupe botanique et coloration

Messagede YVES50 » 05 Jan 2021 19:21

Bonsoir,
C'est curieux mais il semble que la safranine soit fixée sur des ilots de sclérenchyme* qui apparaissent ainsi très rosés.
On retrouve un peu de cette coloration dans le bois primaire.

* au dessus du liber qui lui n'a pas pris le colorant
Cordialement,
Yves
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Re: Première coupe botanique et coloration

Messagede BINO-BONI » 06 Jan 2021 12:25

Les résultats sont plutôt bons. La coupe est régulière et fine ce qui n'est pas évident à réaliser pour un néophyte.
Je ne connais pas les résultats attendus avec la Safranine, mais la cellulose me semble pas trop saturée.

En revanche, les objectifs 4x et 10x ne sont pas "plan" ce qui est dommage car la netteté en souffre sur une partie de la photo (centre ou périphérie)
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Re: Première coupe botanique et coloration

Messagede Yin_Zhen » 07 Jan 2021 10:34

Merci pour les commentaires !
Effectivement, le microscope est un peu basique. Parmi ses objectifs, les x40 et x100 sont clairement les meilleurs. La qualité du projectif doit intervenir aussi. Un jour, j'upgraderai tout ça...
Pour ce qui est de la coloration, je ne sais pas trop comment l'interpréter. Il me semble que c'est plus évident avec le carmino-vert, non ? Sur quoi la safranine est-elle sensée se fixer prioritairement ? La lignine ?
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Re: Première coupe botanique et coloration

Messagede Dutilleul9 » 07 Jan 2021 19:37

Bonsoir Xavier,
Jolie cette coupe à la safranine.
Utilises-tu le couteau avec le microtome de Ranvier ou une lame à rasoir ?
Je trouve qu'il est difficile d'avoir une coupe fine avec le couteau, ça m'a un peu refroidie pour
faire des coupes végétales.
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Re: Première coupe botanique et coloration

Messagede Yin_Zhen » 07 Jan 2021 19:59

Merci ! :)
J'utilise une lame de rasoir "prisonnière".
Il s'agit de ce modèle de microtome : https://www.lelaborantin.com/microtome- ... 74082.html
Pour l'instant, je n'ai pas eu de souci, sauf avec des coupes de pomme de terre : j'ai dû doubler l'épaisseur :? .
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Re: Première coupe botanique et coloration

Messagede Dutilleul9 » 06 Mai 2021 12:01

Bonjour Xavier,

Une petite question, j'ai vu que tu peux choisir la coupe avec ton microtome, est-ce facile, comment procèdes-tu et les coupes sont-elles bien fines ?
J'avoue que je n'y suis jamais arrivée vraiment avec le microtome de Ranvier, avec le grand couteau"rasoir" qui va avec, sauf pour les champignons.
Dommage, car ce n'est pas l'envie qui me manque d'effectuer des coupes.
J'ai essayé aussi à main levée avec un bistouri, oh la,la c'est bien trop épais. :lol:
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