Préparation du pollen

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Re: Préparation du pollen

Messagede DUTILLEUL213 » 12 Mar 2017 18:35

Bonsoir,

C'est une bonne idée d'initier les élèves aux différents pollens ! :)
Je le trouve intéressant ce pollen de bouleau, il n'est pas dépourvu de détails.
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Re: Préparation du pollen

Messagede sofia-agro » 22 Jan 2019 17:39

bonjour à tous,
si il vous plait j'ai une question à propos la technique de prépare les lames de référence de pollen , j'ai besoin une technique référencée àfin de préparer ma thése de doctorat svp aidez moi
je suis en train d'attendre vos aides, et merci d'avance
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Re: Préparation du pollen

Messagede BINO-BONI » 23 Jan 2019 00:00

Bonsoir
La technique exposée par André convient tout à fait alors pourquoi chercher plus compliqué?

L'un des spécialistes de l'analyse des miels et de l'analyse pollinique est Paul Schweitzer. Recherche sur Google à partir de son nom pour essayer de voir s'il a développé une technique particulière. A mon avis je ne pense pas et de plus ses photos sont nettement moins bonnes que celles de pollen qui ont été présentées ici car faites sans focus stacking donc avec une partie de la surface où il manque pas mal de détails car la profondeur de champ est insuffisante!
Il y a aussi Michel Vérollet sur ce site: http://pollens.pagesperso-orange.fr/frames.htm

PS: si tu veux obtenir un peu d'aides sur ce site, il serait bon que tu commences par te présenter ;)
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Re: Préparation du pollen

Messagede sofia-agro » 06 Fév 2019 17:21

Merci monsieur pour votre aide , j ai une question, j'ai pas trouvé la gélatine glycériné comment je peux la préparer
je suis en train d'attendre votre réponse merci et bonne journée
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Re: Préparation du pollen

Messagede Maraussan » 06 Fév 2019 17:27

Eau (distillée, ou de source sans chlore) 40gr
Gélatine en poudre (ou en feuille pour la cuisine, les confitures...) 8gr
Glycérine (pharmacie) 50gr
un antiseptique type cristaux de Phénol ou thymol (obligatoire, en pharmacie) 2gr

On peut diviser par 2 ou 4 tous les constituants, ce sont des proportions en fait (ici pour faire 100 milli-litres de produit, 1/10 de litre donc. Et c'est bien pour un gros labo, mais trop pour un particulier).

On laisse gonfler la gélatine dans l'eau froide 2H au minimum (ou une nuit...)
Fondre lentement à 40°C pas plus (passé 70°C, la gélatine sera inactivée) au bain-marie
Additionner la glycérine.
Additionner le Thymol ou Phénol.
Homogénéiser.

j'ai besoin une technique référencée àfin de préparer ma thése de doctorat svp aidez moi
Il n'y a pas de laboratoire ni de support dans ton Université ??
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Re: Préparation du pollen

Messagede Volatil » 01 Mai 2020 18:16

Bonjour,

Connaissez-vous des méthodologies de coloration palynologique pour une observation sous fluorescence ?
La fluorescence vous semble t-elle d'un usage pertinent pour visualiser la morphométrie des pollens ?

Amitiés.
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Re: Préparation du pollen

Messagede Maraussan » 01 Mai 2020 18:23

Bonjour,
excellente idée, si tu disposes du matériel.

Google, argument "Autofluorescence emission from pollen".

exemple : https://www.microscopyu.com/gallery-images/pine-pollen-grains
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Re: Préparation du pollen

Messagede Volatil » 01 Mai 2020 18:39

Bonjour Maraussan,

Merci pour le lien. Image d'illustration de l'article incroyable.
Je suis équipé en fluorescence mais je ne suis pas certain du filtre utilisé sur mon olympus. Je crois 467 - 556 FITC Fluorescein, je ne pense pas que cela soit adapté ?
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Re: Préparation du pollen

Messagede BINO-BONI » 01 Mai 2020 21:10

Bonsoir

En prévision de l'épuisement de ma glycérine gélatinée et de mon vert de méthyl, j'ai usé de substituts:
- dans un flacon de 15 ml : 3 suppositoires à la glycérine (soit 10 g environ) + qq cl d'eau (pour arriver à la même composition approximative de la formule originale + chauffage au micro onde (10 secondes ) et le tour est joué! Le seul risque est d'obtenir une GG un peu épaisse, il suffit de rajouter de l'eau pour arriver à la bonne fluidité. Chaque suppositoire de 3.2 g contient 1.92 g de glycérine soit 60% donc un peu plus que la formule originale qui se situe à 46%.
Par contre aucun fabriquant ne précise la teneur en gélatine. A mon avis par expérience, elle se situe au-dessus des 7.7 % de la formule originale d'où la nécessité de rajouter de l'eau à hauteur de 4 - 5 ml
- ajout de 6 gouttes de Vert de méthyl pour mon petit flacon 15 ml.
- préparation habituelle du pollen sur la lame (dégraissage à l'alcool (ou à l'acétone qui marche bien également...mais pas toujours) :(
- Chauffage de la GG colorée 10 s au micro onde pour la liquéfier: agiter un peu avec une aiguille fine pour homogénéiser la fluidité sans secouer au risque de provoquer la formation de bulles .
- déposer une goutte de GG fondue sur la préparation.
- Poser immédiatement la lamelle et presser délicatement puis poser un boulon de 10 pour maintenir la pression.

La coloration au BM faible au départ se renforce un peu par la suite (jusqu'à 24 h) le résultat est excellent et régulier.

Avantages:
- méthode rapide (comme la GG Jelly) mais la GG fondue est plus facile à manipuler.
- coloration très régulière d'un échantillon à l'autre ( avec la coloration au VM directement en phase liquide, il faut chronométrer avec précision sinon c'est la surcoloration assurée qui impose ensuite une régression à l'HCL à 5% (qui marche aussi très bien). On n'a pas cet inconvénient.
- Pas d'opération délicate pour aspirer le colorant avec des morceaux de Kleenex qui embarquent parfois le pollen!

Inconvénient: Pas de régression possible.

En cas de couleur trop faible, je pense qu'il doit être possible de la renforcer en réchauffant la lame sur une plaque chaude (ou aune lampe à led ce qui est mon cas). A vérifier. Mais si la teneur de la GG en colorant est bonne, il n'est pas nécessaire (sauf exception) de renforcer la couleur. Pour déterminer la dose de VM, j'ai procédé par ajout de 2 gouttes à la fois puis essai sur un échantillon
En principe cette méthode doit pouvoir s'adapter à tous les autres colorants utilisés en palynologie (fushine, safranine, bleu de méthylène...).
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Re: Préparation du pollen

Messagede Volatil » 03 Mai 2020 00:14

Bonjour BINO-BONI,

Merci pour la recette maison!

J'ai essayé avec de la Gel KY habituellement utilisé pour les pièces d'insectes (genitalia d'araignées notamment). Je l'ai aussi utilisé en montage scellé avec du Brunseal Clear de Brunel, après quelques mois, la préparation est bonne et stable. A voir sur du plus long terme. Ça peut dépanner et le Gel ne coûte pas grand chose.

As-tu déjà essayé de passer directement au baume du Canada après déshydratation/coloration?
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