Bonsoir
En prévision de l'épuisement de ma glycérine gélatinée et de mon vert de méthyl, j'ai usé de substituts:
- dans un flacon de 15 ml : 3 suppositoires à la glycérine (soit 10 g environ) + qq cl d'eau (pour arriver à la même composition approximative de la formule originale + chauffage au micro onde (
10 secondes ) et le tour est joué! Le seul risque est d'obtenir une GG un peu épaisse, il suffit de rajouter de l'eau pour arriver à la bonne fluidité. Chaque suppositoire de 3.2 g contient 1.92 g de glycérine soit 60% donc un peu plus que la formule originale qui se situe à 46%.
Par contre aucun fabriquant ne précise la teneur en gélatine. A mon avis par expérience, elle se situe au-dessus des 7.7 % de la formule originale d'où la nécessité de rajouter de l'eau à hauteur de 4 - 5 ml
- ajout de 6 gouttes de Vert de méthyl pour mon petit flacon 15 ml.
- préparation habituelle du pollen sur la lame (dégraissage à l'alcool (ou à l'acétone qui marche bien également...mais pas toujours)
- Chauffage de la GG colorée 10 s au micro onde pour la liquéfier: agiter un peu avec une aiguille fine pour homogénéiser la fluidité sans secouer au risque de provoquer la formation de bulles .
- déposer une goutte de GG fondue sur la préparation.
- Poser immédiatement la lamelle et presser délicatement puis poser un boulon de 10 pour maintenir la pression.
La coloration au BM faible au départ se renforce un peu par la suite (jusqu'à 24 h) le résultat est excellent et régulier.
Avantages:
- méthode rapide (comme la GG Jelly) mais la GG fondue est plus facile à manipuler.
- coloration
très régulière d'un échantillon à l'autre ( avec la coloration au VM directement en phase liquide, il faut chronométrer avec précision sinon c'est la surcoloration assurée qui impose ensuite une régression à l'HCL à 5% (qui marche aussi très bien). On n'a pas cet inconvénient.
- Pas d'opération délicate pour aspirer le colorant avec des morceaux de Kleenex qui embarquent parfois le pollen!
Inconvénient: Pas de régression possible.
En cas de couleur trop faible, je pense qu'il doit être possible de la renforcer en réchauffant la lame sur une plaque chaude (ou aune lampe à led ce qui est mon cas). A vérifier. Mais si la teneur de la GG en colorant est bonne, il n'est pas nécessaire (sauf exception) de renforcer la couleur. Pour déterminer la dose de VM, j'ai procédé par ajout de 2 gouttes à la fois puis essai sur un échantillon
En principe cette méthode doit pouvoir s'adapter à tous les autres colorants utilisés en palynologie (fushine, safranine, bleu de méthylène...).