Maraussan a écrit:Bonjour à tous,
désolé de m’immiscer dans tes préparations, mais une phase d'étuvage de 10 heures minimum dans le PEG 4000 à température > 55° est considérée comme indispensable, sinon le spécimen n'est pas imprégné, et se dissocie du milieu d'inclusion lors de la coupe. Le spécimen étant obligatoirement fixé au préalable. A l'AFA - Alcool-Formol-Acétique par exemple.
L'imprégnation est un phénomène physique lent, hélas...
En vadrouille, je n'ai jamais trouvé mieux comme étuve/bain-Marie thermostaté qu'un simple chauffe-biberon. Ou un chauffe-cire à épiler, recyclé.
Merci Alain de ce conseil pertinent.
Comme tu vois, j'ai tendance à partir du plus simple vers le plus compliqué..., et puis je me dis que si André fait une utilisation basique du PEG, c'est qu'il a de bonnes raisons...
Expérience 4 : 27 mars 2017
Une fois bien desséchées derrière le pare-brise, j’ai repris les apothécies de ma seconde expérience.
- J’en extrais 5 sous la bino
- Je les immerge dans le fondant du PEG
- Laisse refroidir
- Découpe à la gilette (beaux copeaux qui s’enroulent !)
- Rince les coupes à l’eau deux fois en épongeant
- Sélectionne les plus minces sous la bino
- Monte une lame en ajoutant une goutte de bleu coton lactique et observe…
Ce coup ci, j’ai près d’une dizaine de coupes exploitables, dont deux de doubles apothécies !
Néanmoins, avoir de belles coupes n’est pas une garantie d’obtenir des asques et des spores comme le montre la photo suivante qui résume l’examen de toutes les coupes :
Il ne faut pas en tirer de conclusions, car le traitement que j’ai fait subir à ces apothécies peut expliquer leur infertilité apparente : 72 h dans l’eau, puis 2 jours derrière le pare-brise en plein soleil… pas l’idéal pour des organismes dont la dessiccation est utilisée pour projeter les spores au loin…
Ce qui est important ici, c'est que l'inclusion directe d'apothécies dures, sans humectation, permet de réaliser à main levée des coupes fines tout à fait utilisables, sans aucun décollement de l'objet inclus (désolé Alain...).
J'ai même été surpris de voir de fins copeaux mixte PEG/apothécie s'enrouler lors de la coupe.
Quoiqu’il en soit, le PEG devient de plus en plus simple d’utilisation. Ce jour je vais l’essayer sur une coupe de feuille longue de Romulea et sur des podétions tubulaires de Cladonia rangiformis.