Le Naturaliste

Bonjour,

Beaucoup de Colpes dans mes nouvelles cultures, ceci me permet de réaliser plusieurs tests de prises de vues, et de traitements chimiques des ciliés pour améliorer la visibilité des carapaces.

Stacking d'environ 20-30 images après traitement et fixation
DIC Splanapo 100






A+

JM

Bonsoir,
Merci Jean-Marc pour ces super-photos !
Évidemment, cela m'intéresserait de savoir quels sont les traitements effectués, fixation et amélioration de la visibilité.

Bonjour Bernard,

Merci,
Les coleps sont tués et fixés avec quelques gouttes de formaldéhyde. Je traite ensuite avec de l'hypochlorite (d'autres produits seront testés), pour éliminer si possible la membrane, ce qui permet de mieux voir les dents de la partie buccale. Enlever le surplus de liquide, monter entre lame et lamelle, en veillant à mettre la juste quantité de liquide pour que les coleps soient tenus sans être écrasés, sinon, tout le process précedent n'a aucun intérêt.

A+

JM

Bonsoir Jean Marc, tous,
Merci pour ces précisions, cela donne envie de réaliser ce type d'observations !

Hello,

Une petite dernière. Pendant que certains messages de sujets animés ,parlent de stacks sur quelques dixièmes de mm, je fais des petis stacks sur quelques microns .

Même condition de prise de vue, mais pas de traitement à l'hypochlorite.
Stacks de 30 images.



A+

JM

Bravo,
les images sont superbes et c'est remarquable en effet de faire ces zédifications sur des sujets de quelques microns et qu'il faut immobiliser pour cela.

J'ai 2 questions qui me viennent:
Y a-t-il d'autres ciliés que ces Coleps qui auraient le mème genre de "cytosquelette " observable au microscope optique après préparation ?

Est-ce que c'est bien des bactéries qui apparaissent sur le fond des images? Est-ce que leur paroi résiste au traitement chimique ?

Bravo Jean Marc pour cette superbe image ! 30 piles pour voir à la fois les cils du cytostome et les épines postérieures et en plus l'arrangement des plaques ectoplasmiques est encore plus net que sur tes sujets précédents !
Je n'ose même plus regarder mes propres photos de COLEPS
Une indiscrétion : comment régles-tu la distance entre tes clichés ? manuel ? motorisé pas à pas (genre Arduino )?

Salut Jean Marc,
Excellentissime

Hello,

Merci à tous,

@Daniel :
- Je ne sais pas si il y a d'autres ciliés avec un exo squelette, cela ne me dit rien. Cependant il existe des formes de ciliés qui se déforment peu avec des traitements chocs au formol ou picroformol. Cela devient souvent une question de dosage.
- Le traitement au formol ne semble pas détruire la carapace, et c'est pour cela que j'ai stoppé le traitement à l 'hypochlorite
- sur les photos précédentes ceux sont bien les bactéries que l'on distingue. Le formol et l'hypochlorite ne semblent pas détruire leur squelette. L'hypochlorite attaque plutôt la calcite, pas les squelettes siliceux ou glycoprotéiques.

@Yves
Il n'y a pas d'indiscrétion, le pas à pas se fait manuellement. La main reste un outil extraordinaire de précision et de sensation.
Le pas est d'environ 1µm, soit une demi de mes graduations. La question de motoriser le pas à pas se poserait si je devais faire plus de 100 images (et avec un déclenchement automatique programmé !).
Pour moi l'important est d'attendre le parfait moment où le cilié ne bouge plus (dû à des courants de liquides ou des mouvements browniens), mais qu'il n'est pas encore déformé. donc il faut faire cela l’œil à l'oculaire. Vive les minéraux qui ne bougent pas !

Précisions complémentaires que je n'aurais peut-être pas données :
Objectif : SPLANAPO 100/0,70-1,40 (utilisé à NA = 1,40)
Condenseur : Achro immersion NA = 1,32
Multiplicateur de Gx : x1,60
Contraste interférentiel.
Echantillonnage à la prise de vue : plus petit détail/10 pixels
Poses 1/10e (sans flash)

A+

JM

Salut Jean-Marc.
Mais qu'est-ce qu'on peut dire de plus ?
Amitiés.
Philippe